Imunocytochemie (Aktualizováno 2015)

Autor: Susan Van Noorden

Uchování cytologických vzorků pro imunocytochemii

Předmluva

Imunocytochemie je nyní zásadní metodou pro úplnou a přesnou diagnostiku tkáňových vzorků, ať již z formalinem fixovaných bloků, nebo cytologických preparátů z kartáčků, seškrabů, stěrů, nebo tenkojehlových aspirátů. Úspěch metody závisí do značné míry na morfologickém zachování buněk, jakož i cílových detekovaných antigenech. Špatně připravené nebo nevhodně uchované nátěry nebo jiné preparáty pouze plýtvají vzorkem, reagenciemi a časem a poskytují nespolehlivé výsledky. Proto je tak významné základní ošetření materiálu. 

Obsah

  • Příprava a fixace vzorků
  • Principy imunocytochemie
    • Odhalení antigenu
    • Blokáda endogenní peroxidázy
    • Blokáda nespecifického pozadí
  • Ředění protilátky
    • Ředící roztok
    • Optimalizace
  • Kontroly
  • Aparatura
  • Otázky hodné zvláštního zřetele v imunocytopatologii
  • Dodatek
    • Espostiho tekutina
    • Pufry
      • Fosfátový pufr
      • Tris-pufr
    • Ředění protilátek
    • Uchovávání protilátek
    • Blokáda endogenní peroxidázy
    • Tepelně indukované odhalení epitopu
      • Citrátový pufr
      • TRIS/EDTA pufr
      • Mikrovlnná metoda
    • Roztok diaminobenzidinu pro vyvolání peroxidázy
    • Imunocytochemická metoda (manuál)
X